Homogénéisation (biologie) - Homogenization (biology)
L'homogénéisation , en biologie cellulaire ou en biologie moléculaire , est un processus par lequel différentes fractions d'un échantillon biologique deviennent égales en composition. Il peut s'agir d'un signe de maladie en histopathologie ou d'un processus intentionnel en recherche: un échantillon homogénéisé est de composition égale partout, de sorte que le retrait d'une fraction ne modifie pas la composition moléculaire globale de l'échantillon restant et est identique à la fraction supprimé. L'homogénéisation induite en biologie est souvent suivie d'une extraction moléculaire et de diverses techniques analytiques, y compris ELISA et Western blot.
Méthodes
L'homogénéisation des tissus en solution est souvent réalisée en même temps que la lyse cellulaire . Cependant, pour empêcher la lyse, le tissu (ou la collection de cellules, par exemple à partir d' une culture cellulaire ) peut être maintenu à des températures légèrement supérieures à zéro pour empêcher l' autolyse , et dans une solution isotonique pour empêcher les dommages osmotiques .
Si la congélation du tissu est possible, la cryohomogénéisation peut être réalisée dans des conditions «sèches», et est souvent la méthode de choix chaque fois qu'il est souhaitable de collecter plusieurs classes moléculaires distinctes (par exemple à la fois protéines et ARN ) à partir d'un seul échantillon ou d'un ensemble combiné échantillons, ou lorsque le stockage à long terme d'une partie de l'échantillon est souhaité. La cryohomogénéisation peut être réalisée à l'aide d'un mortier et d'un pilon surfondus (approche classique), ou le tissu peut être homogénéisé en l'écrasant en une poudre fine à l'intérieur d'un sac en plastique propre reposant contre un bloc métallique solide surfondu (technique plus récente et plus efficace) .
L'homogénéisation à haute pression est utilisée pour isoler le contenu des bactéries à Gram positif , car ces cellules sont exceptionnellement résistantes à la lyse et peuvent être combinées avec une stérilisation à haute température.
L'homogénéisation par Dounce est une technique adaptée aux tissus mous de mammifères, tandis que la lyse des cellules de mammifères a également été démontrée par centrifugation.