Fractionnement cellulaire - Cell fractionation
Le fractionnement cellulaire est le processus utilisé pour séparer les composants cellulaires tout en préservant les fonctions individuelles de chaque composant. Il s'agit d'une méthode qui a été utilisée à l'origine pour démontrer la localisation cellulaire de divers processus biochimiques. D'autres utilisations du fractionnement subcellulaire consistent à fournir une source enrichie d'une protéine pour une purification supplémentaire et à faciliter le diagnostic de divers états pathologiques.
Homogénéisation
Le tissu est typiquement homogénéisé dans une solution tampon qui est isotonique pour arrêter les dommages osmotique. Les mécanismes d'homogénéisation comprennent le broyage, le hachage, le hachage, les changements de pression, le choc osmotique , la congélation-décongélation et l' ultra-son . Les échantillons sont ensuite conservés au froid pour éviter les dommages enzymatiques. C'est la formation d'une masse homogène de cellules (homogénat cellulaire ou suspension cellulaire ). Il s'agit de broyer les cellules dans un milieu approprié en présence de certaines enzymes avec un pH, une composition ionique et une température corrects. Par exemple, la pectinase qui digère la lamelle moyenne parmi les cellules végétales.
Filtration
Cette étape peut ne pas être nécessaire selon la source des cellules . Le tissu animal est cependant susceptible de produire du tissu conjonctif qui doit être retiré. Généralement, la filtration est obtenue soit en versant à travers de la gaze, soit avec un filtre d'aspiration et le filtre en céramique de qualité appropriée.
Purification
La purification est réalisée par centrifugation différentielle - l'augmentation séquentielle de la force gravitationnelle entraîne la séparation séquentielle des organites en fonction de leur densité .
Voir également
Milieux pour la séparation cellulaire par densité: