Chromatographie liquide – spectrométrie de masse - Liquid chromatography–mass spectrometry

Chromatographie liquide-spectrométrie de masse

Système LCMS à piège à ions avec interface ESI
Acronyme	LCMS
Classification	Chromatographie Spectrométrie de masse
Analytes	molécules organiques biomolécules
Fabricants	Agilent Bruker PerkinElmer SCIEX Shimadzu Scientific Thermo Fisher Scientific Waters Corporation
Autres techniques
En rapport	Chromatographie en phase gazeuse-spectrométrie de masse

La chromatographie liquide–spectrométrie de masse ( LC–MS ) est une technique de chimie analytique qui combine les capacités de séparation physique de la chromatographie liquide (ou HPLC ) avec les capacités d'analyse de masse de la spectrométrie de masse (MS). Chromatographie couplée - Les systèmes MS sont populaires dans l'analyse chimique car les capacités individuelles de chaque technique sont améliorées de manière synergique. Alors que la chromatographie liquide sépare les mélanges contenant plusieurs composants, la spectrométrie de masse fournit une identité structurelle des composants individuels avec une spécificité moléculaire et une sensibilité de détection élevées. Cette technique en tandem peut être utilisée pour analyser des composés biochimiques, organiques et inorganiques que l'on trouve couramment dans des échantillons complexes d'origine environnementale et biologique. Par conséquent, la LC-MS peut être appliquée dans un large éventail de secteurs, notamment la biotechnologie , la surveillance de l'environnement, la transformation des aliments et les industries pharmaceutiques , agrochimiques et cosmétiques .

En plus des dispositifs de chromatographie liquide et de spectrométrie de masse, un système LC-MS contient une interface qui transfère efficacement les composants séparés de la colonne LC vers la source d'ions MS. L'interface est nécessaire car les appareils LC et MS sont fondamentalement incompatibles. Alors que la phase mobile dans un système LC est un liquide sous pression, les analyseurs MS fonctionnent généralement sous vide poussé (environ 10 ^-6 Torr / 10 ^-7 "Hg ). Ainsi, il n'est pas possible de pomper directement l' éluat de la colonne LC Dans l'ensemble, l'interface est une partie mécaniquement simple du système LC-MS qui transfère la quantité maximale d'analyte, élimine une partie importante de la phase mobile utilisée en LC et préserve l'identité chimique des produits de chromatographie (chimiquement inerte). En tant qu'exigence, l'interface ne doit pas interférer avec l'efficacité d'ionisation et les conditions de vide du système MS. De nos jours, les interfaces LC-MS les plus largement appliquées sont basées sur des stratégies d'ionisation à pression atmosphérique (API) telles que l'ionisation par électrospray (ESI), l'ionisation chimique à pression atmosphérique (APCI) et la photoionisation à pression atmosphérique (APPI) Ces interfaces sont devenues disponibles dans les années 90 après un processus de recherche et développement de deux décennies.

Histoire de la LC-MS

Le couplage de la chromatographie avec la SM est une stratégie d'analyse chimique bien développée datant des années 1950. Chromatographie en phase gazeuse (GC) - MS a été introduit à l'origine en 1952, lorsque AT James et AJP Martin essayaient de développer des techniques de séparation en tandem - analyse de masse. Dans la GC, les analytes sont élués de la colonne de séparation sous forme de gaz et la connexion avec les sources d'ions à ionisation électronique ( EI ) ou à ionisation chimique ( CI ) dans le système MS était un défi techniquement plus simple. Pour cette raison, le développement des systèmes GC-MS a été plus rapide que celui de la LC-MS et de tels systèmes ont été commercialisés pour la première fois dans les années 1970. Le développement des systèmes LC-MS a pris plus de temps que celui de la GC-MS et était directement lié au développement d'interfaces appropriées. VL Tal'roze et ses collaborateurs ont commencé le développement de la LC-MS au début des années 1970, lorsqu'ils ont utilisé pour la première fois des capillaires pour connecter des colonnes LC et des sources d'ions MS. Une stratégie similaire a été étudiée par McLafferty et ses collaborateurs en 1973. C'était le premier et le plus évident moyen de coupler LC avec MS, et était connu sous le nom d'interface d'entrée capillaire. Cette interface pionnière pour la LC-MS avait les mêmes capacités d'analyse que la GC-MS et était limitée aux analytes plutôt volatils et aux composés non polaires de faible masse moléculaire (inférieure à 400 Da). Dans l'interface d'entrée du capillaire, l'évaporation de la phase mobile à l'intérieur du capillaire était l'un des principaux problèmes. Au cours des premières années de développement de la LC-MS, des alternatives en ligne et hors ligne ont été proposées comme alternatives de couplage. En général, le couplage hors ligne impliquait la collecte de fractions, l'évaporation du solvant et le transfert des analytes vers le MS à l'aide de sondes. Le processus de traitement des analytes hors ligne prenait du temps et il y avait un risque inhérent de contamination de l'échantillon. Rapidement, on s'est rendu compte que l'analyse de mélanges complexes nécessiterait le développement d'une solution de couplage en ligne entièrement automatisée en LC-MS.

Interface à courroie mobile

L'interface à bande mobile (MBI) a été développée en 1977. Cette interface était constituée d'une bande mobile sans fin recevant l'effluent de la colonne LC. Sur la courroie, le solvant a été évaporé en chauffant doucement et en évacuant efficacement les vapeurs de solvant sous pression réduite dans deux chambres à vide. Après avoir retiré la phase liquide, les analytes se désorberaient de la ceinture et migreraient vers la source d'ions MS à analyser. Le MBI a été utilisé avec succès pour les applications LC-MS entre 1978 et 1990, car il permettait le couplage de dispositifs LC à MS utilisant des sources d'ions EI, CI et de bombardement à atomes rapides (FAB). Les systèmes MS les plus courants connectés par des interfaces MBI aux colonnes LC étaient des instruments à secteur magnétique et à quadripôle . Les interfaces MBI pour la LC-MS ont permis à la MS d'être largement appliquée dans l'analyse de médicaments, de pesticides, de stéroïdes, d'alcaloïdes et d' hydrocarbures aromatiques polycycliques . Cette interface n'est plus utilisée en raison de sa complexité mécanique et des difficultés liées au renouvellement des courroies. Les interfaces de faisceau de particules ont repris les larges applications de MBI pour LC-MS en 1988.

Interface d'introduction directe de liquide

L'interface d'introduction directe de liquide (DLI) a été développée en 1980. Cette interface a été pensée comme une solution à l'évaporation de liquide à l'intérieur de l'interface d'entrée capillaire. En DLI, un nébuliseur a été utilisé pour désintégrer une partie de l'effluent provenant de la colonne. Un petit diaphragme a été utilisé pour former un jet liquide composé de petites gouttelettes qui ont ensuite été séchées dans une chambre de désolvatation. Une colonne capillaire microbore a été utilisée pour transférer le produit liquide nébulisé vers la source d'ions MS. Les analytes ont été ionisés à l'aide d'une source d'ionisation chimique assistée par solvant, où les solvants LC agissaient comme gaz réactifs. Pour utiliser cette interface, il a été nécessaire de fractionner le flux sortant de la colonne LC car seule une petite partie de l'effluent (10 à 50 μl/min sur 1 ml/min) a pu être analysée en ligne sans casser le MS vide. L'un des principaux problèmes de fonctionnement de l'interface DLI était le colmatage fréquent des orifices du diaphragme. L'interface DLI a été utilisée entre 1982 et 1985 pour l'analyse des pesticides, des corticostéroïdes, des métabolites dans l'urine de cheval, de l'érythromycine et de la vitamine B ₁₂ . Cependant, cette interface a été remplacée par l'interface thermospray, qui a supprimé les limitations de débit et les problèmes de colmatage des diaphragmes.

Interface de thermospray

L'interface thermospray (TSP) a été développée en 1983 par les laboratoires Vestal de l'Université de Houston. L'interface résulte d'un projet de recherche à long terme visant à trouver une interface LC-MS capable de gérer des débits élevés (1 ml/min) et d'éviter la division du débit dans les interfaces DLI. L'interface TSP était composée d'une sonde chauffée, d'une chambre de désolvatation et d'un écumeur d'échange d'ions. L'effluent LC a traversé la sonde chauffée et a émergé sous la forme d'un jet de vapeur et de petites gouttelettes s'écoulant dans la chambre de désolvatation à basse pression. L'ionisation des solutés s'est produite par évaporation directe ou réactions ion-molécule induites par le solvant. Cette interface était capable de gérer jusqu'à 2 ml/min d'éluat de la colonne LC et l'introduirait efficacement dans le système de vide MS. Le TSP était également plus adapté aux applications LC-MS impliquant la chromatographie liquide en phase inversée (RT-LC). Le système TSP avait une double fonction agissant comme une interface et une source d'ionisation chimique à médiation par un solvant. Avec le temps, la complexité mécanique du TSP a été simplifiée et cette interface est devenue populaire en tant que première interface LC-MS idéale pour les applications pharmaceutiques comprenant l'analyse de médicaments , de métabolites, de conjugués, de nucléosides , de peptides , de produits naturels et de pesticides . L'introduction du TSP a marqué une amélioration significative pour les systèmes LC-MS et a été l'interface la plus largement appliquée jusqu'au début des années 1990, lorsqu'elle a commencé à être remplacée par des interfaces impliquant l'ionisation à pression atmosphérique (API).

Interfaces basées sur FAB

Les interfaces fritté FAB et flux continu-FAB (CF-FAB) ont été développées respectivement en 1985 et 1986. Les deux interfaces étaient similaires, mais différaient en ce que la première utilisait une sonde frittée poreuse comme canal de connexion, tandis que CF-FAB utilisait une pointe de sonde. À partir de ceux-ci, le CF-FAB a eu plus de succès en tant qu'interface LC-MS et a été utile pour analyser les composés non volatils et thermiquement labiles. Dans ces interfaces, l'effluent LC traversait les canaux frittés ou CF-FAB pour former un film liquide uniforme à la pointe. Là, le liquide était bombardé de faisceaux d'ions ou d'atomes de haute énergie (atome rapide). Pour un fonctionnement stable, les interfaces basées sur FAB étaient capables de gérer des débits de liquide de seulement 1 à 15 l et étaient également limitées aux colonnes microbores et capillaires. Afin d'être utilisés dans les sources d'ionisation FAB MS, les analytes d'intérêt doivent être mélangés avec une matrice (par exemple, du glycérol) qui pourrait être ajoutée avant ou après la séparation dans la colonne LC. Les interfaces basées sur FAB ont été largement utilisées pour caractériser les peptides, mais ont perdu leur applicabilité avec l'avènement des interfaces basées sur l' électrospray en 1988.

Chromatographie liquide

La chromatographie liquide est une méthode de séparation physique dans laquelle les composants d'un mélange liquide sont répartis entre deux phases non miscibles, c'est-à-dire stationnaire et mobile. La pratique de la LC peut être divisé en cinq catégories, à savoir, la Chromatographie d'adsorption , Chromatographie de partage , la Chromatographie par échange d'ions , chromatographie d'exclusion de taille et chromatographie d'affinité . Parmi celles-ci, la variante la plus utilisée est le mode en phase inverse (RP) de la technique de chromatographie de partage, qui utilise une phase stationnaire non polaire (hydrophobe) et une phase mobile polaire. Dans les applications courantes, la phase mobile est un mélange d'eau et d'autres solvants polaires (par exemple, méthanol, isopropanol et acétonitrile), et la matrice stationnaire est préparée en attachant des groupes alkyle à longue chaîne (par exemple, n-octadécyle ou C ₁₈ ) à la surface de particules de silice de forme irrégulière ou sphérique de 5 µm de diamètre.

En HPLC, typiquement 20 l de l'échantillon d'intérêt sont injectés dans le flux de phase mobile délivré par une pompe haute pression. La phase mobile contenant les analytes traverse le lit de phase stationnaire dans une direction définie. Les composants du mélange sont séparés en fonction de leur affinité chimique avec les phases mobile et stationnaire. La séparation se produit après des étapes répétées de sorption et de désorption se produisant lorsque le liquide interagit avec le lit stationnaire. Le solvant liquide (phase mobile) est délivré sous haute pression (jusqu'à 400 bar ou 300 000 torr) dans une colonne garnie contenant la phase stationnaire. La haute pression est nécessaire pour obtenir un débit constant pour des expériences de chromatographie reproductibles. Selon la répartition entre les phases mobile et stationnaire, les composants de l'échantillon s'écouleront hors de la colonne à des moments différents. La colonne est le composant le plus important du système LC et est conçue pour résister à la haute pression du liquide. Colonnes classiques LC sont 100-300 mm de long avec un diamètre externe de 6,4 mm (1/4 de pouce) et un diamètre interne de 3,0 - 4,6 mm. Pour les applications impliquant la LC-MS, la longueur des colonnes de chromatographie peut être plus courte (30 à 50 mm) avec des particules de remplissage de 3 à 5 µm de diamètre. En plus du modèle conventionnel, d'autres colonnes LC sont les modèles à alésage étroit, microbore, microcapillaire et nano-LC. Ces colonnes ont des diamètres internes plus petits, permettent une séparation plus efficace et gèrent des débits de liquide inférieurs à 1 ml/min (le débit conventionnel). Afin d'améliorer l'efficacité de séparation et la résolution des pics, la chromatographie liquide ultra performante (UPLC) peut être utilisée à la place de la HPLC. Cette variante LC utilise des colonnes remplies de particules de silice plus petites (~1,7 m de diamètre) et nécessite des pressions de fonctionnement plus élevées dans la plage de 310 000 à 775 000 torr (6 000 à 15 000 psi).

Spectrométrie de masse

La spectrométrie de masse (MS) est une technique analytique qui mesure le rapport masse/charge ( m/z) de particules chargées (ions). Bien qu'il existe de nombreux types de spectromètres de masse, tous utilisent des champs électriques ou magnétiques pour manipuler le mouvement des ions produits à partir d'un analyte d'intérêt et déterminer leur m/z. Les composants de base d'un spectromètre de masse sont la source d'ions , l' analyseur de masse , le détecteur et les systèmes de données et de vide. La source d'ions est l'endroit où les composants d'un échantillon introduit dans un système MS sont ionisés au moyen de faisceaux d'électrons, de faisceaux de photons ( lumières UV ), de faisceaux laser ou de décharge corona . Dans le cas de l'ionisation par électronébulisation, la source d'ions déplace les ions qui existent en solution liquide dans la phase gazeuse. La source d'ions convertit et fragmente les molécules d'échantillon neutres en ions en phase gazeuse qui sont envoyés à l'analyseur de masse. Tandis que l'analyseur de masse applique les champs électriques et magnétiques pour trier les ions selon leurs masses, le détecteur mesure et amplifie le courant ionique pour calculer l'abondance de chaque ion résolu en masse. Afin de générer un spectre de masse qu'un œil humain peut facilement reconnaître, le système de données enregistre, traite, stocke et affiche les données dans un ordinateur.

Le spectre de masse peut être utilisé pour déterminer la masse des analytes, leur composition élémentaire et isotopique, ou pour élucider la structure chimique de l'échantillon. MS est une expérience qui doit se dérouler en phase gazeuse et sous vide (1,33 * 10 ^-2 à 1,33 * 10 ^-6 pascal). Par conséquent, le développement de dispositifs facilitant la transition d'échantillons à pression plus élevée et en phase condensée (solide ou liquide) vers un système sous vide a été essentiel pour développer la SM comme un outil puissant pour l'identification et la quantification de composés organiques comme les peptides. La SM est maintenant très utilisée dans les laboratoires d'analyse qui étudient les propriétés physiques, chimiques ou biologiques d'une grande variété de composés. Parmi les nombreux types d'analyseurs de masse, ceux qui trouvent une application dans les systèmes LC-MS sont les analyseurs quadripolaires , à temps de vol (TOF) , à pièges à ions et hybrides quadripolaires-TOF (QTOF) .

Interfaces

L'interface entre une technique en phase liquide (HPLC) avec un éluat en écoulement continu, et une technique en phase gazeuse réalisée sous vide a été longtemps difficile. L'avènement de l'ionisation électrospray a changé cela. Actuellement, les interfaces LC-MS les plus courantes sont l'ionisation par électrospray (ESI), l'ionisation chimique à pression atmosphérique (APCI) et la photo-ionisation à pression atmosphérique (APPI). Il s'agit de nouvelles sources d'ions MS qui facilitent la transition d'un environnement à haute pression (HPLC) aux conditions de vide poussé nécessaires à l'analyseur MS. Bien que ces interfaces soient décrites individuellement, elles peuvent également être disponibles dans le commerce en tant que sources d'ions doubles ESI/APCI, ESI/APPI ou APCI/APPI. Diverses techniques de dépôt et de séchage ont été utilisées dans le passé (par exemple, des courroies mobiles), mais la plus courante d'entre elles était le dépôt MALDI hors ligne . Une nouvelle approche encore en développement appelée interface direct-EI LC-MS , couple un système nano HPLC et un spectromètre de masse équipé d'une ionisation électronique.

Ionisation électrospray (ESI)

L'interface ESI pour les systèmes LC-MS a été développée par Fenn et ses collaborateurs en 1988. Cette source d'ions/interface peut être utilisée pour l'analyse de molécules modérément polaires (par exemple, métabolites, xénobiotiques et peptides). L'éluat liquide sortant de la colonne LC est pompé à travers un capillaire métallique maintenu à 3 à 5 kV. Le liquide est nébulisé à l'extrémité du capillaire et une fine pulvérisation de gouttelettes chargées est formée. Pour éviter la contamination, ce capillaire est généralement situé perpendiculairement à l'entrée du système MS. La chaleur créée par le potentiel électrique est utilisée pour évaporer rapidement les gouttelettes dans une atmosphère d'azote sec. Plus tard, les analytes ionisés sont transférés dans la chambre à vide poussé du MS alors que les ions chargés traversent une série de petites ouvertures à l'aide de tensions de focalisation. Des ions chargés positivement et négativement peuvent être détectés et il est possible de basculer entre les modes de fonctionnement négatifs et positifs. La plupart des ions produits dans l'interface ESI sont chargés de manière multiple. L'utilisation de colonnes microbores de 1 à 3 mm de diamètre intérieur est recommandée pour les systèmes LC-MS utilisant des interfaces d'ionisation par électrospray (ESI) car un fonctionnement optimal est obtenu avec des débits compris entre 50 et 200 l/min.

Ionisation chimique à pression atmosphérique (APCI)

Le développement de l'interface APCI pour LC-MS a commencé avec Horning et ses collaborateurs au début de 1973. Cependant, son application commerciale a été introduite au début des années 1990 après que Henion et ses collaborateurs ont amélioré l'interface LC-APCI-MS en 1986. L'APCI la source/l'interface d'ions peut être utilisée pour analyser de petites molécules neutres, relativement non polaires et thermiquement stables (par exemple, des stéroïdes, des lipides et des vitamines liposolubles). Ces composés ne sont pas bien ionisés en utilisant l'ESI. De plus, APCI peut également gérer des flux de phase mobile contenant des agents tampons. Le liquide du système LC est pompé à travers un capillaire et il y a également une nébulisation à la pointe, où une décharge corona a lieu. Premièrement, le gaz ionisant entourant l'interface et le solvant de la phase mobile sont soumis à une ionisation chimique au niveau de la source d'ions. Plus tard, ces ions réagissent avec l'analyte et transfèrent leur charge. Les ions de l'échantillon passent ensuite à travers des écumeurs à petits orifices au moyen de lentilles de focalisation d'ions. Une fois à l'intérieur de la région de vide poussé, les ions sont soumis à une analyse de masse. Cette interface peut fonctionner en modes de charge positive et négative et des ions à charge unique sont principalement produits. La source d'ions APCI peut également gérer des débits compris entre 500 et 2000 l/min et elle peut être directement connectée aux colonnes conventionnelles de 4,6 mm de DI.

Photoionisation à pression atmosphérique (APPI)

L'interface APPI pour LC-MS a été développée simultanément par Bruins et Syage en 2000. APPI est une autre source/interface d'ions LC-MS pour l'analyse de composés neutres qui ne peuvent pas être ionisés à l'aide d'ESI. Cette interface est similaire à la source d'ions APCI, mais au lieu d'une décharge corona, l'ionisation se produit en utilisant des photons provenant d'une lampe à décharge. Dans le mode APPI direct, des ions moléculaires d'analyte à charge unique sont formés par absorption d'un photon et éjection d'un électron. Dans le mode dopant-APPI, un composé facilement ionisable (Dopant) est ajouté à la phase mobile ou au gaz de nébulisation pour favoriser une réaction d'échange de charge entre l'ion moléculaire dopant et l'analyte. L'échantillon ionisé est ensuite transféré à l'analyseur de masse sous vide poussé lorsqu'il passe à travers des écumeurs à petit orifice.

Applications

Le couplage des systèmes MS avec les systèmes LC est attrayant car la chromatographie liquide peut séparer des mélanges naturels délicats et complexes, dont la composition chimique doit être bien établie (par exemple, fluides biologiques, échantillons environnementaux et médicaments). De plus, la LC-MS a des applications dans l'analyse des résidus d'explosifs volatils. De nos jours, la LC-MS est devenue l'une des techniques d'analyse chimique les plus utilisées car plus de 85 % des composés chimiques naturels sont polaires et thermiquement labiles et la GC-MS ne peut pas traiter ces échantillons. À titre d'exemple, la HPLC-MS est considérée comme la principale technique d'analyse pour les laboratoires de protéomique et pharmaceutiques. D'autres applications importantes de la LC-MS incluent l'analyse des aliments, des pesticides et des phénols végétaux .

Pharmacocinétique

La LC-MS est largement utilisée dans le domaine de la bioanalyse et est particulièrement impliquée dans les études pharmacocinétiques des produits pharmaceutiques. Des études pharmacocinétiques sont nécessaires pour déterminer à quelle vitesse un médicament sera éliminé des organes du corps et du flux sanguin hépatique. Les analyseurs MS sont utiles dans ces études en raison de leur temps d'analyse plus court et de leur sensibilité et spécificité supérieures par rapport aux détecteurs UV couramment associés aux systèmes HPLC. Un avantage majeur est l'utilisation de la MS-MS en tandem , où le détecteur peut être programmé pour sélectionner certains ions à fragmenter. La quantité mesurée est la somme des fragments moléculaires choisis par l'opérateur. Tant qu'il n'y a pas d'interférences ou de suppression d'ions en LC-MS , la séparation LC peut être assez rapide.

Protéomique/métabolomique

La LC-MS est utilisée en protéomique comme méthode pour détecter et identifier les composants d'un mélange complexe. L' approche LC-MS de protéomique ascendante implique généralement la digestion et la dénaturation de la protéase en utilisant la trypsine comme protéase, l'urée pour dénaturer la structure tertiaire et l'iodoacétamide pour modifier les résidus de cystéine. Après digestion, la LC-MS est utilisée pour l'empreinte de masse peptidique , ou la LC-MS/MS (tandem MS) est utilisée pour dériver les séquences des peptides individuels. La LC-MS/MS est le plus souvent utilisée pour l'analyse protéomique d'échantillons complexes où les masses peptidiques peuvent se chevaucher même avec une spectrométrie de masse à haute résolution. Des échantillons de complexes biologiques (par exemple, sérum humain) peuvent être analysés dans des systèmes LC-MS/MS modernes, qui peuvent identifier plus de 1000 protéines. Cependant, ce haut niveau d'identification des protéines n'est possible qu'après séparation de l'échantillon au moyen d'un gel SDS-PAGE ou HPLC-SCX. Récemment, la LC-MS/MS a été appliquée à la recherche de biomarqueurs peptidiques. Un exemple en est la découverte et la validation récentes de biomarqueurs peptidiques pour quatre pathogènes bactériens majeurs des voies respiratoires ( Staphylococcus aureus , Moraxella catarrhalis ; Haemophilus influenzae et Streptococcus pneumoniae ).

La LC-MS est devenue l'une des techniques les plus couramment utilisées dans le profilage global des métabolites de tissus biologiques (par exemple, plasma sanguin, sérum, urine). La LC-MS est également utilisée pour l'analyse des produits naturels et le profilage des métabolites secondaires dans les plantes. À cet égard, les systèmes basés sur MS sont utiles pour acquérir des informations plus détaillées sur le large spectre de composés à partir d'échantillons biologiques complexes. La LC-Résonance magnétique nucléaire ( RMN ) est également utilisée en métabolomique végétale, mais cette technique ne permet de détecter et de quantifier que les métabolites les plus abondants. La LC-MS a été utile pour faire avancer le domaine de la métabolomique végétale, qui vise à étudier le système végétal au niveau moléculaire en fournissant une caractérisation non biaisée du métabolome de la plante en réponse à son environnement. La première application de la LC-MS en métabolomique végétale a été la détection d'une large gamme de métabolites, d' oligosaccharides , d' acides aminés , de sucres aminés et de nucléotides de sucre hautement polaires à partir des tissus du phloème de Cucurbita maxima . Un autre exemple de LC-MS en métabolomique végétale est la séparation et l'identification efficaces du glucose , du saccharose , du raffinose , du stachyose et du verbascose à partir d'extraits de feuilles d' Arabidopsis thaliana .

Développement de médicaments

La LC-MS est fréquemment utilisée dans le développement de médicaments car elle permet une confirmation rapide du poids moléculaire et une identification de la structure. Ces fonctionnalités accélèrent le processus de génération, de test et de validation d'une découverte à partir d'une vaste gamme de produits avec une application potentielle. Les applications LC-MS pour le développement de médicaments sont des méthodes hautement automatisées utilisées pour la cartographie peptidique, la cartographie des glycoprotéines , la lipodomie, la déplication de produits naturels, le criblage de bioaffinité, le criblage de médicaments in vivo, le criblage de stabilité métabolique, l'identification de métabolites, l'identification d'impuretés, la bioanalyse quantitative et le contrôle qualité.

Voir également

• Chromatographie en phase gazeuse-spectrométrie de masse
• Électrophorèse capillaire-spectrométrie de masse
• Spectrométrie de mobilité ionique – spectrométrie de masse

Les références

Lectures complémentaires