Outils moléculaires Plasmodium - Plasmodium molecular tools
Les outils moléculaires Plasmodium sont un ensemble de méthodes pour la manipulation génétique du parasite du genre Plasmodium . Les espèces de Plasmodium ont été difficiles à étudier scientifiquement, en partie à cause de l'incapacité de nombreuses techniques biologiques standard à modifier génétiquement l' organisme . Des recherches récentes ont cherché à surmonter ces barrières techniques afin de rendre le parasite plus facile à étudier. Vous trouverez ci-dessous une description des méthodes publiées de contrôle génétique du parasite Plasmodium .
Transformation
- Électroporation
- globules rouges chargés
Niveau d'ADN
Règlement de transcription
- Système transactivateur basé sur Tet - contrôle inductible par un ligand de la transcription génique basé sur le système Tet ( P. falciparum )
Systèmes d'intégration
- Rep20 médié
- Intégrase Bxb1 - intégration génétique stable spécifique au site dans les chromosomes médiée par l' intégrase du mycobactériophage Bxb1 ( P. falciparum )
Systèmes de recombinaison
- Flp/FRT - recombinaison / mutagenèse spécifique au site induite à l'aide du système de levure Flp/FRT ( P. berghei )
Systèmes de transposons
- piggyBac -élément transposable aux lépidoptères pour une intégration aléatoire et efficace de l' ADN dans le génome ( P. falciparum )
Niveau d'ARN
- ARNi
- antisens
- ribozyme auto-clivant - Une tentative infructueuse d'utiliser un ribozyme auto-clivant inductible pour contrôler la dégradation de l' ARNm des transcrits fusionnés ( P. falciparum )
Niveau de protéines
- Domaine de déstabilisation FKBP - domaine régulable par le ligand (Shld1) pour favoriser la dégradation de la protéine de fusion ( P. falciparum )
- Domaine de déstabilisation DHFR -ligand ( Triméthoprime )-domaine régulable pour favoriser la dégradation de la protéine de fusion P. falciparum . En raison du marquage de la protéine dans un domaine de dégradation de la DHFR d' E. coli , ainsi que de la GFP et d'une étiquette HA , les niveaux de protéine peuvent être régulés, la localisation cellulaire de la protéine peut être déterminée et la protéine peut être purifiée à partir de parasites cultivés. .